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l_asym_0_25 [2020/06/18 18:27] Nicolas Schabanel [2020.06.15-16 Réception des plaques] |
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===== 2020.06.15-16 Réception des plaques ===== | ===== 2020.06.15-16 Réception des plaques ===== | ||
- | === 2020.06.18 Confection des tubes === | + | ===== 2020.06.18 Confection des tubes ===== |
- | * TAE Mg 10x: | + | * **TAE Mg 10x:** |
- | * Tube de 2000uL: TAE 400uL@50x + Mg 250uL@100 + H20 1350uL = TAE 10x + Mg@125mM | + | * **Tube de 2000uL:** TAE 400uL@50x + Mg 250uL@100 + H20 1350uL = TAE 10x + Mg@125mM |
* **Tube n°1: little L** | * **Tube n°1: little L** | ||
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* Tube n°33 = 240uL de n°11 (Long BA 2) | * Tube n°33 = 240uL de n°11 (Long BA 2) | ||
* Tube n°34 = 240uL de n°12 (Long BA 3) | * Tube n°34 = 240uL de n°12 (Long BA 3) | ||
- | | + | |
+ | ===== 2020.06.19-07.23 ===== | ||
+ | * **Tube T2' dilué à 1:2000:** 5uL de T2 (little L) dilué à 1:200 + 5uL TAEMg 10x + 40uL H20 -> concentration des strands estimée à 0.15nM mis à cuire le 2020.06.19 à 19:00 pour 2 semaines (cf courbe ci-dessous) | ||
+ | * **Tube L-all à ~200nM:** 5uL de T5, T6, T7, T9 et 2.3uL de T8 + 5uL TAEMg 10x + 23.7uL H20 mis à cuire avec le tube ci-dessus | ||
+ | * **courbe de température suivie:** 90°C (15min) -> 50°C ->[-0.5°C/15min x40]-> [ 30°C (4h) > 32°C (30s) ] x99 (=400h ~17j) -> 28°C (hold pendant 3 semaines de plus) | ||
+ | * //Les deux tubes ont été mis au frais le 2020.07.23 à 17:00 dans des tubes sans étiquette// | ||
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+ | ===== 2020.06.26 ===== | ||
+ | Prélèvement d'un échantillon de T2' (20uL prélevé) et de L-all (10uL prélevé) au bout d'une semaine de cuisson. | ||
+ | Imagerie AFM peu lisible pour L-all, concentration toujours trop élevée, même dilué 1:500, il faut sans doute diluer encore un peu plus. | ||
+ | Pas d'imagerie de T2' |